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3xFLAG peptide
  • 產品型號:
  • 廠商性質:經(jīng)銷商
  • 更新時間:2024-12-13
  • 訪  問  量:611
簡要描述:

3xFLAG peptide:工作液配置:3xFLAG -peptide常用工作液濃度為100ug/ml,可用于從Anti-FLAG M2親和凝膠上洗脫3xFLAG融合蛋白。5倍柱體積的工作溶液即可充分洗脫大部分3xFLAG融合蛋白

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產品詳情

南京信帆生物對質量的控制涵蓋生物試劑、放行、市場質量反饋的全過程,包括原輔料、包裝材料、工藝用水、中間過程及成品的質量標準和分析方法的建立、取樣、檢驗和產品穩(wěn)定性考察和市場不良反饋樣品的復核等工作,確保產品品質。信帆生物致力于追求企業(yè)的發(fā)展,以創(chuàng)新為根本,不斷優(yōu)化運作,為每一位科研用戶提供更優(yōu)質的產品和更熱情的服務。

10MG/[920.00]

3xFLAG peptide

簡介:3X FLAG Peptide是一個合成的含有三個重復DYKXXD氨基酸序列的多肽。

氨基酸序列:MDYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK(簡稱)

N-Met-Asp-Tyr-Lys-Asp-His-Asp-Gly-Asp-Tyr-Lys-Asp-His-Asp-Ile-Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys-C(全稱)

分子式:C120H169N31O49S 分子量:2861.87

技術指標

外觀:凍干粉

純度:>95% by LC-MS

溶解性:water 2mg/ML; TBS (5mg/ml);

儲存條件:-20

運輸條件:常溫運輸

用途:蛋白洗脫;科研試劑。

使用方法推薦(來自公開文獻僅供參考)

一:常見儲存液或者工作液配置方法

儲存液配置:3xFLAG peptide溶于1XTBS(pH7.4),濃度為5mg/ml; 分裝儲存于-20℃,避免反復凍融。

工作液配置:3xFLAG -peptide常用工作液濃度為100ug/ml,可用于從Anti-FLAG M2親和凝膠上洗脫3xFLAG融合蛋白。5倍柱體積的工作溶液即可充分洗脫大部分3xFLAG融合蛋白

二:

哺乳動物細胞FLAG標簽蛋白純化方案

一般注釋以下方案基于并優(yōu)化了哺乳動物細胞(U2OS)中FLAG標記蛋白的過表達,該細胞生長在一個10平方厘米的平板上,以90%的融合率轉染,并在48小時后收獲。該方案適用于相互作用蛋白的共純化(基于FLAG-Ring1B/Bmi1)。

1重新懸浮和Sonicate細胞將冷凍的哺乳動物細胞沉淀重新懸浮在2 mL FLAG純化懸浮緩沖液(1XPBS、1mM DTT、1X蛋白酶抑制劑)中。為了保持酶活性,這種再懸浮緩沖液不含任何裂解劑。除了超聲波處理(1%Triton X或其他)外,非用于活性采集的純化物還可以使用實際的裂解緩沖液。該方案僅使用超聲波處理。

將混合物轉移到干凈的2 mL微管中,用Misonix XL-2000聲波儀上的“振幅設置1[共20個]"超聲處理2次,每次持續(xù)10秒,中間暫停1分鐘。

2制備細胞裂解物并用磁珠孵育。在4℃下以12000 g離心細胞裂解物20分鐘,使裂解物碎片沉淀。

使用2mL“微量"純化柱,用2mL FLAG純化懸浮緩沖液沖洗柱。

將100µL M2 FLAG親和珠轉移到柱中,用2 mL FLAG純化懸浮緩沖液洗掉凝膠。

干燥柱鼻(底部),并用蓋子緊緊蓋上,然后轉移離心機中的上清液



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