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Poly(A)聚合酶操作方法!

更新時間:2019-04-09      瀏覽次數(shù):3147

Poly(A)聚合酶操作方法!

 

PolyA 聚合酶為加A聚合酶,該酶以RNA為模板在RNA的3′末端加入20~200個A堿基??蓱?yīng)用于增強mRNA的穩(wěn)定性,及microRNA加A尾,為cDNA合成提供oligo-dT引物結(jié)合位點等。信帆生物生物試劑的PolyA聚合酶是E.coli來源的,該酶是以單鏈RNA 作為模板,ATP作為底物進行聚合反應(yīng)的。

組分

組分名稱                                      數(shù)量

Poly(A) Polymerase(5U/μl)      20 μl /200 μl

10XEPAP Reaction Buffer           500 μl

10 mM ATP                             100 μl/500 μl

25 mM MnCl2                            500 μl

 

來源

重組表達的E.coli來源的Poly(A)聚合酶。

 

單位定義

在37℃、pH7.9 的條件下,以ATP 為底物,10 分鐘內(nèi)把1 nmol的AMP 聚合到RNA上所需要的酶量定義為1個活性單位(U)。

 

應(yīng)用

RNA 3' 標(biāo)記增強RNA穩(wěn)定性microRNA加A尾,為cDNA合成提供oligo-dT引物結(jié)合位點

 

儲存

-20°C可保存2年。

 

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