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磷鎢酸負(fù)染色液使用說(shuō)明!

更新時(shí)間:2019-03-27      瀏覽次數(shù):1434

磷鎢酸負(fù)染色液使用說(shuō)明!

 

負(fù)染色又稱(chēng)陰性染色,是由Hall發(fā)現(xiàn)的相對(duì)于普通染色(即正染色)而言的染色技術(shù)。其原理在于利用重金屬鹽包繞低電子密度的樣品,增強(qiáng)樣本四周的電子密度,造成細(xì)微結(jié)構(gòu)之間的"質(zhì)量-厚度”差異,增強(qiáng)散射吸收反差,使樣品在黑暗的背景上呈現(xiàn)明亮的結(jié)構(gòu)。負(fù)染色液有磷鎢酸、鉬酸銨、印度墨汁等,其中常用的是1~3%磷鎢酸。 

磷鎢酸負(fù)染色液(3%)適用于顯示大分子、細(xì)菌、病毒、原生動(dòng)物、噬菌體、細(xì)胞器、核酸大分子、蛋白質(zhì)晶體及其他大分子材料等。染色后的樣品圖像呈現(xiàn)透明的亮光,而背景圖像呈黑色。

 

信帆生物在原有的基礎(chǔ)上,針對(duì)不同客戶(hù)的多種要求,推出了符合大多數(shù)實(shí)驗(yàn)的新品種:

磷鎢酸負(fù)染色液(2%)

磷鎢酸負(fù)染色液(3%)

磷鎢酸負(fù)染色液(5%)

負(fù)染色法(Negative stain)是一種染色方法,常用于不透光液體標(biāo)本的鏡檢。由于其染色處理過(guò)程并非針對(duì)菌體本身,故又稱(chēng)“襯托染色法”、“間接染色法”。在負(fù)染色法中,標(biāo)本不需要熱固定,細(xì)胞不會(huì)因?yàn)榛瘜W(xué)藥物的影響而變形,對(duì)于不易染色的細(xì)菌或病毒也能觀察

 

原理:

負(fù)染色法需要使用酸性染料來(lái)染色,如伊紅或苯胺黑。因?yàn)榧?xì)菌體表面帶負(fù)電,而酸性染料的色原也帶負(fù)電,所以色原只能將背景染色,才能使沒(méi)有染色的細(xì)胞很容易的被觀察到。一些染色劑,鐵氰化鋨,化學(xué)活性非常強(qiáng)。作為強(qiáng)氧化劑,它們主要與交鍵類(lèi)脂和不飽和碳碳鍵反應(yīng),從而改變樣本組織的生物膜特性并將其染色。

使用負(fù)染色法可以看到普通光學(xué)顯微鏡下無(wú)法看清的結(jié)構(gòu)。該方法主要用于觀察病毒、細(xì)菌、細(xì)菌鞭毛、生物膜等結(jié)構(gòu),這些結(jié)構(gòu)的電子散射能力均較低。

 

磷鎢酸負(fù)染色液使用說(shuō)明!