T細胞受體(T cell receptor，TCR)是T細胞表面特異性識別抗原和介導(dǎo)免疫應(yīng)答的分子，是人類基因組中多態(tài)性zui高的區(qū)域之一，決定著人的免疫系統(tǒng)如何適應(yīng)環(huán)境的變化。T細胞受體庫的多樣性(包括基因重組以及選擇性表達)直接反映了機體免疫應(yīng)答的狀態(tài)。

TCR可分為TCRα/β和TCRγ/δ兩種類型, 外周血T細胞主要為TCRα/β的T細胞, 是介導(dǎo)機體特異性細胞免疫反應(yīng)的主要細胞。如圖1所示：TCRβ基因由可變區(qū)(V)、多變區(qū)(D)、結(jié)合區(qū)(J)和恒定區(qū)(C)四部分基因片段組成，形成互補決定區(qū)(complementarities determining region, CDR)和間隔的4個骨架區(qū)(framework region, FR)。

在T細胞發(fā)育過程中CDR1，2和FR區(qū)域相對保守，CDR3區(qū)由V、 D和J 進行重排(如圖2所示)而形成具有功能的TCR編碼基因(T細胞克隆)，由于V (65-100種)、D (2種)、J (13種)基因片段本身具有多樣性，此外，由于在重排的過程中，在VD及D-J的連接區(qū)經(jīng)常有非模板的核苷酸的隨機插入或刪除，進一步增加了CDR3區(qū)的多樣性(連接形成的多樣性約為2 × 1011)。這種基因片段連接的不準(zhǔn)確性使TCR的表達呈多樣性, 以識別各種不同的抗原。正常個體在無抗原刺激時，TCR基因重排是隨機的，因此正常人外周T細胞呈多家族、多克隆性特點。不同抗原(腫瘤、疫苗、病院微生物或者移植物等)刺激后，TCR V區(qū)基因可對該\抗原產(chǎn)生特異性識別，并使帶有這類基因的 T細胞得到優(yōu)勢擴增，可用于分析不同 TCR V亞家族 T細胞的表達和利用。

T細胞受體測序(TCR seq)，采用多重擴增的手段獲取TCRβ的CDR3區(qū)域，結(jié)合高通量測序技術(shù)，結(jié)合生物信息學(xué)分析手段，分析VDJ重排的方式等，廣泛應(yīng)用于腫瘤免疫、自身免疫性疾病、*免疫監(jiān)測、疫苗注射免疫監(jiān)測等領(lǐng)域。

技術(shù)特點

多重擴增：使用多組PCR引物對TCRβ的CDR3區(qū)域進行擴增，而非探針捕獲

高通量：一次測序得到別條數(shù)的序列信息

高準(zhǔn)確性：從幾個到幾十萬個拷貝的計數(shù)

高分辨率：可以檢測至單堿基差異

重復(fù)性好：深度測序保證了檢測的隨機性，可不需技術(shù)重復(fù)

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