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WB實驗代測之抗體選擇有講究

更新時間:2015-08-26      瀏覽次數(shù):1793

抗體毀了你的western blot實驗?親,你并不是孤單的一個人。有時,你會發(fā)現(xiàn)新一批次的抗體無法再現(xiàn)之前的結(jié)果。有時,你甚至發(fā)現(xiàn)抗體根本不能與目標(biāo)蛋白結(jié)合。錢花了不說,時間也一去不復(fù)返。如何選擇適當(dāng)?shù)腤B抗體,讓專家來教你幾招。 

1. 根據(jù)應(yīng)用來購買
抗體是一個通用的工具,但它們本身也有局限性。有些抗體無法結(jié)合變性的蛋白,這就讓它在western blot中表現(xiàn)很糟。你要購買的產(chǎn)品是經(jīng)過western blotting的驗證,有數(shù)據(jù)做支持。如果只有幾篇文獻(xiàn),那要小心,因為它通常只顯示了目的條帶,而不清楚是否有非特異的條帶。 

   南京信帆生物有自己的生物科研實驗室,可以進(jìn)行WESTERN BLOT代測,只要你樣本準(zhǔn)備好,寄給我們就可以了,剩下的事情不用你煩心。我們不僅代做實驗,還免費(fèi)提供常規(guī)抗體,節(jié)約您的大量時間,歡迎我司專業(yè)客服人員,必定給你一個滿意的答復(fù)。


2. 查看所有的數(shù)據(jù)
供應(yīng)商的通常列出了抗體的應(yīng)用以及引用的文獻(xiàn),你應(yīng)該一篇一篇地去看。如果在選購時參考的數(shù)據(jù)不多,那么實驗可能會有風(fēng)險。 
3. 并非所有驗證都相同
一些供應(yīng)商會明明白白地告訴你它們?nèi)绾悟炞C抗體。為了節(jié)約時間和成本,許多公司并沒有驗證每一批的抗體,因此批次之間可能存在相當(dāng)大的差異。有些公司在驗證中使用過表達(dá)的蛋白來證明抗體能夠與目的蛋白結(jié)合。由此產(chǎn)生的數(shù)據(jù)并不能很好地說明抗體在western blot中表現(xiàn)如何??贵w若是經(jīng)過全細(xì)胞裂解液以及各種樣品的檢驗,每一批都是如此,那么就值得購買。 
4. 使用第三方資源
一些機(jī)構(gòu),如CiteAb,提供了抗體引用的數(shù)據(jù)庫。而另一些自己開展檢測,并公開他們的數(shù)據(jù)。不過,盡管他們綜合了大量的數(shù)據(jù),但這往往來自單一來源,通常是二手的。因此,你需要檢查這些信息是否與供應(yīng)商上的一手?jǐn)?shù)據(jù)一致。 
 
5. 做好優(yōu)化的準(zhǔn)備
供應(yīng)商的驗證并不能*取代內(nèi)部的檢驗。你的樣品不同,操作步驟也不*相同。而這些因素都會影響抗體的表現(xiàn),因此需要將你的western blot與抗體的驗證分開而論。你的研究,zui終還是需要你來把關(guān)。 
6. zui終原則
無論你是采購還是使用抗體,你都必須記住抗體技術(shù)存在缺陷,它們可能會有變化。在選擇抗體時需要嚴(yán)謹(jǐn)。盡可能使用陽性和陰性對照,控制你自己的偏見,確保你的western blot能提供正確的答案。

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